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肾缺血再灌注损伤模型实验步骤以及注意事项

时间:2024-06-05


肾脏缺血再灌注损伤模型构建步骤

  1. 动物准备:选取体重约250g的大鼠作为实验动物,使用适当的麻醉方法(如腹腔内注射麻醉剂),确保动物在整个手术过程中无痛感。背部剃毛并进行严格的术前消毒,以预防感染。

  2. 暴露肾脏:在消毒并准备好的动物背部,通过轻柔按压识别肾脏位置,通常位于背部脊椎两侧,紧邻最后一对肋骨下方约1厘米处。小心解剖并分离覆盖在肾脏表面的脂肪和筋膜,充分暴露肾动脉。

  3. 肾动脉夹闭:精确识别并分离出肾动脉,使用微型动脉夹迅速而轻柔地夹闭,确保肾脏血流完全中断。长沙地区或其他地方的专家均强调,此步骤需谨慎操作,以防止血管损伤,并确保缺血效果确切。

  4. 设定缺血时长:记录开始夹闭的时间,并根据实验设计的需要维持缺血状态,一般缺血时间范围从30分钟到数小时不等。具体时长需依据研究目的而定,过短可能不足以引起显著损伤,过长则可能导致不可逆的组织损伤。

  5. 再灌注与观察:达到预定的缺血时间后,迅速且小心地移除动脉夹,让血液重新流入肾脏,即实现再灌注。之后仔细缝合手术创口,给予适当的术后护理,并密切监测动物的生命体征和行为变化。

  6. 后续评估:在再灌注后的指定时间点(如几小时至几天后),收集血液样本和/或组织样本,进行生化指标检测、组织病理学检查等,以评估肾脏损伤程度和修复情况。

注意事项

  • 无菌操作:整个过程必须严格遵守无菌操作原则,减少感染风险。

  • 动物福利:确保所有实验操作符合伦理标准,尽可能减轻动物痛苦。

  • 技术熟练度:实验者应具备高超的外科手术技能和丰富的动物实验经验。

  • 模型验证:构建模型后,通过多种指标验证IRI模型的成功建立,如血清肌酐、尿素氮水平升高等。

正确执行上述步骤并注意关键细节,是构建稳定可靠的肾脏IRI模型的关键。